25.0生物安全柜的檢測(cè)內(nèi)容和方法

在安裝時(shí)以及以后每隔一定時(shí)間，要由有資質(zhì)的人員按照規(guī)定對(duì)每一臺(tái)生物安全柜的整體運(yùn)行性能進(jìn)行生物的和物理的認(rèn)證，以檢查其是否符合國(guó)家及的性能標(biāo)準(zhǔn)。生物安全柜的檢測(cè)主要包括物理學(xué)檢測(cè)喝生物學(xué)檢測(cè)兩個(gè)方面，其中：
　　
　　安全柜防護(hù)效果的物理學(xué)評(píng)估應(yīng)該包括:
　　
　　①.安全柜的整體、HEPA過濾器的泄漏,
　　
　　②.空氣向下流動(dòng)的速率、空氣的速率,
　　
　　③.負(fù)壓/換氣次數(shù),
　　
　　④.氣流的穩(wěn)定性（煙霧特征）,
　　
　　⑤.以及警報(bào)和自控（互鎖）系統(tǒng).
　　
　　⑥.漏電
　　
　　⑦.照度
　　
　　⑧.紫外線強(qiáng)度
　　
　　⑨.噪聲
　　
　　⑩.震動(dòng)性的測(cè)試。
　　
　　生物學(xué)評(píng)估包括:
　　
　　①.對(duì)個(gè)體保護(hù)效果
　　
　　②.對(duì)環(huán)境保護(hù)效果
　　
　　③.樣品保護(hù)試驗(yàn)
　　
　　④.交叉污染試驗(yàn)。
　　
　　4.1下列情況之一時(shí)，必須對(duì)生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)
　　
　　1）實(shí)驗(yàn)室施工，生物安全柜搬到位置后。
　　
　　2）生物安全柜移動(dòng)位置時(shí)。
　　
　　3）生物安全柜進(jìn)行檢修后。
　　
　　4）生物安全柜更換過濾器后。
　　
　　5）生物安全柜的一年一度的常規(guī)檢測(cè)。
　　
　　4.2I生物安全柜的檢測(cè)
　　
　　4.2.1密閉性檢測(cè)
　　
　　4.2.2排風(fēng)濾器的檢測(cè)
　　
　　1）HEPA濾器泄漏檢測(cè)，安全柜在正常的使用條件下用方法進(jìn)行。
　　
　　2）多分散DOP或相當(dāng)?shù)臍馊苣z通過率不大于0.01%。
　　
　　4.3II級(jí)生物安全柜檢測(cè)
　　
　　4.3.1原則
　　
　　的II級(jí)安全柜必須符合生產(chǎn)國(guó)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，如：美國(guó)、加拿大標(biāo)準(zhǔn)NSF49,英準(zhǔn)BS5726,德準(zhǔn)DIN12950-10,法準(zhǔn)NFX44201,澳大利亞標(biāo)準(zhǔn)AS2252.2等。
　　
　　國(guó)產(chǎn)的II級(jí)生物安全柜生產(chǎn)必須制定相應(yīng)的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，其性能指標(biāo)不低于同類產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)。出廠時(shí)必須按企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)每臺(tái)生物安全柜進(jìn)行檢測(cè)并出具檢測(cè)報(bào)告，使用微生物進(jìn)行的生物安全防護(hù)檢測(cè)不得省略。對(duì)于每個(gè)產(chǎn)品應(yīng)產(chǎn)品性能數(shù)據(jù)單。質(zhì)量控制試驗(yàn)應(yīng)包括：
　　
　　4.3.2煙霧試驗(yàn)：
　　
　　用發(fā)煙器械發(fā)煙，對(duì)煙的流動(dòng)作直觀判斷。
　　
　　1）在工作面中線上方高于工作窗口上沿15cm處，從一端到另一端發(fā)煙，煙的流動(dòng)應(yīng)為向下垂直流線，無逆流，不得有死角和回流，也無煙霧從安全柜溢出。
　　
　　2）距工作窗口0.04m沿窗口外沿同樣發(fā)煙，煙流向柜內(nèi)流動(dòng)無溢出，工作表面無煙霧。
　　
　　3）如為推拉式工作窗口，沿工作窗口的外周邊發(fā)煙，煙流向內(nèi)，無逆流無溢出，工作面無煙霧。
　　
　　4.3.3氣流速度測(cè)定
　　
　　4.3.3.1垂直送風(fēng)氣流速度測(cè)定
　　
　　1）儀器：度為讀數(shù)±3%的風(fēng)速儀（alno8500型熱球）。
　　
　　2）方法：柜內(nèi)送風(fēng)口下方的15m處，均勻布點(diǎn)。測(cè)點(diǎn)間距不大于12cm.測(cè)點(diǎn)布置不少于3行，靠?jī)?nèi)壁的那行距內(nèi)壁15cm,每行數(shù)不少于7個(gè)測(cè)點(diǎn)。
　　
　　3判定：垂直氣流均勻區(qū)所測(cè)平均風(fēng)速是0.38m/s±0.025m/s,單點(diǎn)風(fēng)速與所測(cè)平均風(fēng)速之差不大于20%為合格。
　　
　　4.3.3.2正面窗口進(jìn)風(fēng)的風(fēng)速測(cè)定
　　
　　用計(jì)算方法或?qū)崪y(cè)方法測(cè)出的風(fēng)速。
　　
　　所測(cè)量或計(jì)算的進(jìn)風(fēng)的風(fēng)速與生產(chǎn)給定值之差小于0.025m/s為合格。
　　
　　A1型為0.38m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m寬，每秒的小氣流量應(yīng)是0.002m3.
　　
　　A2型為0.5m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m寬，每秒的小氣流量應(yīng)是0.03m3.
　　
　　B1和B2型為0.5m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m寬，每秒的小氣流量應(yīng)是0.03m3.
　　
　　4.3.4過濾器檢漏試驗(yàn)
　　
　　4.3.4.1送風(fēng)垂直HEPA和過濾器室和框架泄露試驗(yàn)
　　
　　1）送氣HEPA的密閉周圍、濾器室和濾器介質(zhì)要用激光粒子計(jì)數(shù)器掃描法檢測(cè)。無漏點(diǎn)，透過率不可過0.01%或潔凈度達(dá)到100級(jí).
　　
　　2）用瓊脂平皿沉積法檢測(cè)，潔凈度達(dá)到100級(jí)為合格。
　　
　　4.3.4.2排風(fēng)HEPA及過濾器室和框架泄露試驗(yàn)
　　
　　4.3.4.2安全泄漏試驗(yàn)
　　
　　打氣檢漏試驗(yàn)前使生物安全柜處于全關(guān)閉狀態(tài)，即將風(fēng)管和工作窗口關(guān)閉（可用密封膠帶密封）。靜態(tài)（斷電）時(shí)對(duì)生物安全柜內(nèi)部充氣加壓至500Pa，觀察壓力保持情況。壓力30分鐘下降小于10%為合格。或者作肥皂泡試驗(yàn)無漏點(diǎn)。
　　
　　4.3.4.3排風(fēng)HEPE檢漏和透過率試驗(yàn)
　　
　　1）用激光粒子計(jì)數(shù)器，對(duì)排風(fēng)的HEPE及其附屬的濾器室和支架等進(jìn)行檢漏和透過率檢測(cè),沒有漏點(diǎn)，0.3≧μm粒子的透過率<0.01%為合格。
　　
　　2）生物氣溶膠檢測(cè)用間接噴霧器把1-8×10-8濃度的懸液枯草芽胞或黏質(zhì)沙雷氏菌發(fā)生氣溶膠，在安全柜正常工作情況下于HEPA上游攻擊，用2級(jí)安德森生物氣溶膠采樣器進(jìn)行常規(guī)采樣,上游采樣濃度>300pfu/m3,在下游采樣結(jié)果陰性或不過1pfu/m3為合格。
　　
　　4.3.5產(chǎn)品、個(gè)人、環(huán)境保護(hù)和交叉污染的生物試驗(yàn)
　　
　　必須用生物氣溶膠考驗(yàn)安全柜的防護(hù)性能，包括下述內(nèi)容。
　　
　　4.3.5.1個(gè)人保護(hù)試驗(yàn)
　　
　　1）一種方法是在規(guī)定參數(shù)條件下運(yùn)轉(zhuǎn)中，在工作面中央上方35cm,觀察窗的里面10cm的地方，用噴霧器霧化30ml懸液枯草芽胞或黏質(zhì)沙雷式菌，噴霧方向朝外，懸液細(xì)菌的濃度為108個(gè)/ml。4個(gè)安德森生物氣溶膠采樣器，布置在開口中央模擬工作的一個(gè)圓柱體（軸線距工作面7.0cm,模擬1個(gè)手臂）的上下左右，距進(jìn)入工作開口250Cm.處進(jìn)行采樣，試驗(yàn)進(jìn)行30分鐘，全部采樣器采集的細(xì)菌不過10個(gè)（cfu）,試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次。柜內(nèi)對(duì)照一個(gè)平皿收到300pfu以上。細(xì)菌氣溶膠粒子中值質(zhì)量直徑應(yīng)在0.5mm～3.0mm之間。
　　
　　2）另按一種方法在圓柱體周圍放4個(gè)AGI，采樣入口在安全柜的前面距觀察窗6.3cm。其中2個(gè)AGI相距15cm,在圓柱體上面水平切面上，另外2個(gè)AGI-30相距5cm，在圓柱體下面2.5cm,處。另外2個(gè)2級(jí)安德森空氣微生物采樣器放在2側(cè)，進(jìn)氣口水平面上，距離操作口15cm，距離側(cè)壁20cm。2個(gè)AGI放在進(jìn)氣口水平工作面上方36cm,安全柜邊緣外面5cm處，.每一個(gè)距離中心15cm.）.
　　
　　AGI所有的采樣液體用47mm,0.22的濾膜過濾，貼在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)24-28h,如果陰性繼續(xù)觀察到44-48h.
　　
　　對(duì)于新型和重要改進(jìn)的安全柜，上述試驗(yàn)應(yīng)在下列條件下進(jìn)行：在原本進(jìn)入氣流流速減去0.05±0.015m/s，在原本向下氣流流速加上和減去0.05±0.015m/s,氣流流速用儀器直接測(cè)量。每臺(tái)安全柜都應(yīng)作氣流檢測(cè)。
　　
　　在作向下氣流調(diào)整時(shí)要用全部測(cè)量的平均速度。
　　
　　在確定向下和進(jìn)入氣流速度時(shí)應(yīng)避免使用不適合的儀器。對(duì)于新的和做了修改設(shè)計(jì)的產(chǎn)品應(yīng)對(duì)進(jìn)入和向下氣流速度減去0.05±0.015m/sd情況下重復(fù)上面的步驟。
　　
　　合格標(biāo)準(zhǔn)：
　　
　　每個(gè)試驗(yàn)6只AGI收到細(xì)菌不過10pfu,2個(gè)裂隙采樣器30分鐘收到的不過5pfu.試驗(yàn)重復(fù)3次，對(duì)照都應(yīng)陽(yáng)性，一個(gè)平皿過300個(gè)pfu.
　　
　　4.3.5.2產(chǎn)品保護(hù)試驗(yàn)
　　
　　全部的工作面，放上沉降平皿。噴霧器放在距觀察窗底部外沿102mm處，方向朝觀察窗，細(xì)菌濃度為（1-8）×10-6。一個(gè)圓柱體放在噴霧器下面50mm處，模擬1個(gè)手臂。試驗(yàn)進(jìn)行5分鐘，柜內(nèi)沉降平皿收到的菌落數(shù)不過5個(gè)，試驗(yàn)需重復(fù)3次。
　　
　　4.3.5.3交叉污染試驗(yàn)
　　
　　柜內(nèi)全部工作面放上沉降平皿。噴霧器放在距工作面上方76-127mm，以一側(cè)壁為背景向另一側(cè)噴霧，細(xì)菌濃度為（1-8）×10-4。試驗(yàn)進(jìn)行5分鐘，結(jié)果在過距攻擊一側(cè)356mm的平皿中不過2個(gè)cfu.2側(cè)攻擊均需3次。
　　
　　4.3.5.4環(huán)境保護(hù)試驗(yàn)
　　
　　在上述攻擊試驗(yàn)的同時(shí)在安全柜排風(fēng)口用一臺(tái)2級(jí)安德森采樣器采樣30分鐘，收到的試驗(yàn)菌不得過2個(gè)cfu。
　　
　　4.3.6.穩(wěn)定性試驗(yàn)
　　
　　對(duì)II級(jí)生物安全柜應(yīng)作抗顛倒和扭曲試驗(yàn)
　　
　　4.3.6.1.抗顛覆按照3101的第七部分執(zhí)行
　　
　　4.3.6.2當(dāng)在接近頂部邊緣（反面）橫向施以110kg力時(shí)，在頂部前沿和側(cè)面頂部向前移位不過1.6mm.
　　
　　4.3.6.3工作表面抗壓力在工作表面中央25×25cm的面積內(nèi)平均分布23kg重量，工作表面沒有偏斜。
　　
　　4.3.6.4抗偏斜110kg放在柜的邊緣處，后面底部抬高不過1.6mm.
　　
　　4.3.7生產(chǎn)應(yīng)資料
　　
　　每一臺(tái)生物安全柜的說明書中應(yīng)有產(chǎn)品質(zhì)量控制數(shù)據(jù)資料。
　　
　　1）壓力降/肥皂泡/識(shí)別氣體檢漏，
　　
　　2）個(gè)人保護(hù)，產(chǎn)品保護(hù)檢測(cè)資料
　　
　　3）環(huán)境保護(hù)檢測(cè)資料
　　
　　4.4其它檢測(cè)
　　
　　1）溫升工作4小時(shí)柜內(nèi)溫升不過8.50C.
　　
　　2）光照度柜內(nèi)平均照度650Lux。個(gè)人讀（眼）處不低于430Lux.
　　
　　3）噪音水平在正常工作狀態(tài)時(shí)，工作面上方38cm,，操作口外面30cm處的噪聲，（在大背景噪聲為57db）不過67db
　　
　　4）振動(dòng)在正常設(shè)定參數(shù)下工作，工作面中央10Hz-10kHz的振動(dòng)頻率的振幅凈位移不過2×10-4in（5×10-6m）rms。
　　
　　5）漏電檢測(cè)接地電阻和電性試驗(yàn)。
　　
　　6）水漕漏水試驗(yàn)4升水1小時(shí)肉眼看不到漏。
　　
　　7）風(fēng)機(jī)性能在設(shè)定風(fēng)速在沒有調(diào)控的情況下，壓力降低50%,新濾器進(jìn)風(fēng)量減少不過10%。